DNA片段重组连接可用下列哪些方法（）

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• 下列与DNA重组连接相关的说法正确的是（）

  A . 不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。 B . 同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。 C . 限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。 D . Mg -ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。 E . 平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。

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• 如果DNA分子重组时，需要用平端连接，下列哪些方法可形成平末端（）。

  A . 3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。 B . 3‘突出的粘末端用核酸酶切平。 C . 5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。 D . 5‘突出的粘末端用核酸酶切平。 E . 利用切口为平末端的限制酶。

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• DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括

  A . A．基因诊断 B . B．基因治疗 C . C．转基因和基因敲除 D . D．单克隆抗体制备 E . E．基因工程药物、疫苗和抗体

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• 重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是（）

  A . A.磷酸钙共沉淀法 B . 脂质体法 C . 显微注射法 D . 噬菌体感染 E . 氯化钙法

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• EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要（）。

  A . 用65℃处理 5～10 分钟使限制性内切核酸酶失活 B . 用CIP处理载体 DNA防止自身环化 C . 进行琼脂糖凝胶电泳监测 D . 上述说法都正确

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• 某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有（）

  A . 4个 B . 3个 C . 2个 D . 至少2个

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• 一般性重组包括DNA片段的物理交换，该过程涉及DNA骨架上磷酸二酯键的断裂和重新形成。

  A . 正确 B . 错误

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• 下列药物哪些是重组DNA药物（）。

  A . 蛋白质工程药物 B . 基因药物 C . 天然生物药物 D . 半合成生物药物

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• DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括（）

  A . A.基因诊断 B . 基因治疗 C . 转基因和基因敲除 D . 单克隆抗体制备 E . 基因工程药物、疫苗和抗体

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• 重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）

  A . A.标志补救筛选 B . 插入表达筛选 C . 抗性筛选 D . 限制性内切酶酶切图谱分析 E . 核酸分子杂交筛选

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• 分子量小，具有抗原结合功能的分子片段是（）将抗体分子片段与其他蛋白融合得到的是（）将鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，其大部分氨基酸序列为人源序列所取代（）特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到（）

  A . 人源化抗体 B . 小分子抗体 C . 抗体融合蛋白 D . 双特异性抗体 E . 抗体库技术

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• 受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组，使受体菌性状发生变异的过程称（）.

  A . 转导 B . 转化 C . 溶源性转换 D . 结合 E . 原生质体融合

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• 某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组，这个过程称为（）

  A . A、接合 B . B、性导 C . C、转导 D . D、转化

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• DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术又称（）

  A . A.基因工程 B . 蛋白质工程 C . 细胞工程 D . 酶工程 E . 分子工程

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• 某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后，产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。

  A . 正确 B . 错误

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• 某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组的过程，称为（）

  A . A、接合 B . B、性导 C . C、转导 D . D、转化

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• DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术又称

  A . A．基因工程 B . B．蛋白质工程 C . C．细胞工程 D . D．酶工程 E . E．分子工程

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• 减数分裂时，等位基因的DNA片段的交换和重组通常发生在（）。

  A . A.偶线期 B . B.粗线期 C . C.双线期 D . D.终变期

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• DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。

  A . A、①②③④ B . B、①④②③ C . C、①③②④ D . D、④①③②

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• 冈崎片段在复制完成后会被连接成完成的DNA链。

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• 重组DNA片段获取的方法主要有______。

  A．从细胞核中直接分离 B．染色体DNA的限制性内切酶酶解 C．反转录法 D．化学合成法 E．转染

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• T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是 （）

  A．2' -OH 和 5' -P B．2' -OH 和 3' -P C．3' -OH 和 2' -P D．3' -OH 和 5' -P

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• 3、DNA的体外连接主要采用的酶是（），两DNA片段间催化形成（）键。

  A．T4连接酶，磷酸二酯键 B．T4连接酶，氢键 C．大肠杆菌DNA连接酶，磷酸二酯键 D．大肠杆菌DNA连接酶，氢键

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• 11、基因工程又叫做重组DNA技术。它的主要工作就是按照人类的意愿，从生物细胞中分离出（）DNA片段进行施工重组，然后把重组后的DNA分子转移到我们操作的生命体中。

  A．自由 B．目的 C．细菌 D．细胞

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