从基因组DNA或mRNA序列克隆基因的方法有哪些？

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• 基因表达要经过两个过程，一是（），即由DNA转录成为mRNA；二是（），即以mRNA为模板合成特定的蛋白质。

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• 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind  Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。   如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？

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• 真核细胞中编码蛋白质的基因多为（），编码的序列还保留在成熟mRNA中的是（），编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是（）；在基因中（）被（）分隔，而在成熟的mRNA中序列被拼接起来。

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• 将鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，其大部分氨基酸序列为人源序列所取代（）。

  A . 人源化抗体 B . 小分子抗体 C . 抗体融合蛋白 D . 双特异性抗体 E . 抗体库技术

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• 一旦克隆了一个遗传定位的基因，就可以用（）技术来鉴定基因组 DNA 文库中与之相邻的基因克隆。

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• 酶基因克隆有哪些常用的方法？

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• 基因组 DNA文库是含有某一生物中全部 DNA 序列随机克隆的克隆群，而 cDNA 文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。

  A . 正确 B . 错误

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• （）技术是对已知DNA序列的基因或基因片段中任意指定位置进行突变的技术

  A . 基因诱变 B . 定点突变 C . 定点改造 D . DNA突变

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• 细胞内粘附分子的基因及基因表达（mRNA）测定方法有（）

  A . 原位PCR B . 原位RT-PCR C . PCR D . RT-PCR E . ELISA

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• 分子量小，具有抗原结合功能的分子片段是（）将抗体分子片段与其他蛋白融合得到的是（）将鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，其大部分氨基酸序列为人源序列所取代（）特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到（）

  A . 人源化抗体 B . 小分子抗体 C . 抗体融合蛋白 D . 双特异性抗体 E . 抗体库技术

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• 在一个克隆基因的分析中发现：一个含有转录位点上游3.8kbDNA的克隆，其mRNA直接转录活性比仅含有3.1kb上游DNA克隆的转录活性大50倍。这表明了什么？

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• 可用于克隆基因载体的DNA有（）。

  A . 细菌质粒DNA B . 噬菌体DNA C . 病毒DNA D . 酵母人工染色体 E . 人基因组DNA

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• 核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术，其原理是选择某一组病原体特异的基因序列，进行克隆、合成，然后用作探针，探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交，核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性，可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是（）

  A . A.固相－液相杂交 B . 原位杂交 C . 液相－液相杂交 D . 液相－固相杂交 E . 荧光原位杂交

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• 细胞内粘附分子的基因及基因表达(mRNA)测定方法有()

  A . A．原位PCR B . B．原位RT-PCR C . C．PCR D . D．RT-PCR E . E．ELISA

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• cDNA 克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。

  A . 正确 B . 错误

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• 可用作克隆基因载体的 DNA 有

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• 3、将目标性状位点精确定位在分子标记连锁图谱上，利用与性状位点紧密连锁的分子标记筛选大片段的DNA文库，构建含目的基因区域的精细物理图谱，采用染色体步行法逼近目的基因，获得含目的基因的大片段克隆，采用亚克隆分析或探针筛选cDNA文库，将目的基因确定于较小片段上，最后对目的基因进行克隆以及功能鉴定从而获得目的基因的方法称为（）。

  A．同源序列克隆法 B．连锁图谱克隆法 C．表达序列标签法 D．差异显示法

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• 动物转基因技术指通过一定方法把人工重组的外源DNA序列导入受体的基因组中或把受体基因组中的一段DNA序列切除，从而使受体动物的遗传信息发生人为改变，并且这种改变能稳定地遗传给后代的技术。

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• 基因克隆中，DNA重组体是指( )

  A．不同来源的两段DNA单链的复性过程 B．目的基因与载体的连接物 C．原核DNA与真核DNA的连接物 D．两种不同的结构基因形成的连接物 E．DNA与RNA的连接物

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• 脊椎动物的DNA中存在假基因，即功能基因在基因组不同位点的无功能的拷贝，它们一般是插入基因组的成熟mRNA的双链DNA拷贝。那么人们根据序列中的什么信息来认定假基因源于cDNA？

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• 外源基因必须插入到克隆载体或表达载体中，形成具有自主复制起点的“重组DNA分子”后才能导入宿主细胞。

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• 克隆的人类基因组DNA可在多种系统表达，例外的是（）

  A．人肠杆菌表达体系 B．昆虫表达体系 C．酵母表达体系 D．仓鼠卵巢细胞表达体系

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• 2、基因有两条链,与mRNA序列相同（T代替U)的链叫做：

  A．模板链 B．编码链 C．重链 D．cDNA链 E．轻链

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• 判断题： 1. DNA重组即基因重组，是将不同来源的DNA分子通过末端共价连接的方式形成重新组合的DNA分子的过程（) 2. 聚合酶链反应（PCR）是一种在体内快速扩增特定基因或DNA序列的方法（) 3. 主要用于基因组DNA分析的印迹技术是Southern blotting （) 4. 蛋白质的印迹分析，也称为Western blotting或免疫组化（) 5. 质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主细胞染色体外而自主复制、并被稳定遗传的一类蛋白分子（)。 6. 限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸外切酶（).

  A．Y.是 B．N.否

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