用Klenow酶填补的办法可使5&39;黏性末端转变成平末端。这种方法常使DNA上的某些限制酶的识别位点消失。请问,对于下列限制酶,用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失?BamH Ⅰ(G↓GATCC)、Taq Ⅰ(T↓CGA)、BssH Ⅱ(G↓CGCGC)。
相似题目
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大肠杆菌DNA聚合酶I催化功能有()、()和()。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I,可将其分为大、小两个片段,其中()片段叫Klenow,具有()和()作用,另外一个片段具有()活性。
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限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT,BamHI 识别的序列为 GGATCC,用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA,不必使酶失活,就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
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Klenow酶
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pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接,无论用哪种方法连接,都可以用同一种酶回收外源片段。
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T4DNA连接酶和 E.coli 连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。
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常用的DNA聚合酶主要有大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ、TaqDNA聚合酶、大肠杆菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段、T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶、反转录酶等。能够体外合成cDNA的聚合酶是()
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1984 年,Hung 和 Wesink 发现如果两个不同的 5’黏性末端通过部分填补得到如下的单链突出末端,即可有效地相互连接: (1)();(2)();(3)()。
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用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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突出的3’末端或凹缺的 3’末端都可以用 Klenow 大片段酶进行末端标记。
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不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。
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大肠杆菌DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶处理得到两个片段,大片段叫Klenow片段,失去了()
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不匹配的黏性末端是不能通过黏性末端连接的。
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用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后,为防止它们自身环化,要用 CIP将它们脱磷酸。
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Klenow 酶与 DNA 聚合酶相比,前者丧失了()的活性。
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T4 DNA 聚合酶与 Klenow酶一样,具有 5’→ 3’,聚合酶和 3’→ 5’外切酶两种性,但是它的 3’→ 5’外切酶的活性比 Klenow酶强()倍。该酶的 3’→ 5’外切活性既能作用于单链 DNA 也能作用于双链 DNA,不过作用于()的活性要强于()链。
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用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定()的;用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端一定是()的。
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klenow片段具有的酶活性包括
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T4DNA聚合酶与klenow片段比较起来拥有更高的
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目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
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【单选题】下列哪种酶具有依赖 DNA 的 RNA 聚合酶活性? A. DNA 聚合酶I B. 引物酶 C. DNA 聚合酶Ⅲ D. .Klenow片段
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逆转录酶具有5&39;→3&39;聚合酶活性和3&39;→5&39;外切核酸酶活性。()
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Klenow片段(Klenow fragment)具有5'→3'聚合酶活性及______外切酶活性,失去了______外切酶活性。
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选择在12℃~16℃之间用DNA连接酶进行黏性末端连接反应,是为了达到什么之间的平衡()?