在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时,应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应。()
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当目的片段无限长时,使用识别碱基数为4和6的限制性内切酶进行切割时,理论上产生的片段数之比是()。
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DNA在紫外光破坏后的修复,要求至少有四种酶:聚合酶,连接酶核酸内切酶,核酸外切酶。在下列四种情况当中,哪种是DNA恢复时酶作用的正确顺序?()
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解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、限制性内切酶都能作用于DNA分子,它们的作用部位都是()。
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在细菌的细胞内有一类识别并水解外源DNA的酶,称为限制性核酸内切酶。
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一环状DNA分子,设其长度为1。已知某种限制性内切酶在该分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指。如果该DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生0.3、0.5、0.2三种不同长度的DNA片段。现有多个上述DNA分子,若在每个分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些DNA分子最多能产生长度不同的线状DNA的种类数是()https://assets.asklib.com/images/image2/2017091809092283928.jpg
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用限制性内切酶将某种生物的DNA切成不同片段,并把所有片段随机地分别连接到用同样内切酶切过的基因载体上,然后分别转移到适当受体细胞中,如细菌。通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系或克隆。如果所制备的克隆数目已多到可把某种生物的全部基因都包含在内时,这一组克隆就成为该种生物的()
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取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是()
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简述限制性内切酶和DNA连接酶的作用机制。
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某种线性DNA含有限制性核酸内切酶EcoRI的1个酶切位点。该DNA样品(甲)经EcoRI酶切后,在DNA连接酶催化下形成产物乙。则反应液中产物乙共有()
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RFLP(restriction fragment length polymorphism,限制性内切酶酶切片段长度多态性)标记
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根据酶切活性对盐浓度的要求,限制性核酸内切酶可分成()
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()
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限制性内切酶在切割DNA分子时会产生哪几种缺口().
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限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端:()、()。
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某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后,产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段,将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环,然后导入受体细胞,都可以进行独立地复制。
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DNA重组技术和遗传工程的出现,才导致了微生物学的许多重大发现,包括质粒载体、限制性内切酶、连接酶、反转录酶等。()
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将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个();,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个()。
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根据酶切活性对盐浓度的要求,限制性核酸内切酶可分成( )
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根据酶切活性对盐浓度的要求,限制性核酸内切酶可分成( )
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利用同一限制性内切酶作用产生的粘性末端的DNA片段,都能通过互补碱基配对连接。()
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一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其()发生改变。
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判断题: 1. DNA重组即基因重组,是将不同来源的DNA分子通过末端共价连接的方式形成重新组合的DNA分子的过程() 2. 聚合酶链反应(PCR)是一种在体内快速扩增特定基因或DNA序列的方法() 3. 主要用于基因组DNA分析的印迹技术是Southern blotting () 4. 蛋白质的印迹分析,也称为Western blotting或免疫组化() 5. 质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主细胞染色体外而自主复制、并被稳定遗传的一类蛋白分子()。 6. 限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸外切酶().
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DNA重组通常包括如下五个步骤:⑴获得需要的目的基因转化受体细胞,使之进入受体细胞并能够在受体细胞内复制和遗传。 ⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等,最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。 ⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用,形成重组DNA分子,并对其加以克隆和筛选。 ⑸对获得外源基因的受体细胞(转化子)进行筛选和鉴定。 上述五个步骤按通常的操作技术应依()顺序进行
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