同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
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限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT,BamHI 识别的序列为 GGATCC,用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA,不必使酶失活,就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端,那么接近末端的程度也影响切割,如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
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由于 DNA是由 4 种碱基组成的,所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是()。
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取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
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由于DNA是由4种碱基组成的,所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是____________________。
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如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
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通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的()。
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用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
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限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生()
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限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后,再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突变体。
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用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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已知某一内切核酸酶在一环状 DNA上有 3 个切点,因此,用此酶切割该环状 DNA,可得到 3 个片段。
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Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在 20~40kDa,通常由()亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA,或 DNA/RNA 杂合链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有()专一性,也具有()的专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有(),产生()末端的DNA片段或()的DNA片段。作用时需要()作辅助因子,但不需要()和()。
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用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连接。
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限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型,其中应用最广的是()
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1970 年,Smith 和 Wilcox 从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶,能够特异性的切割 DNA,这个酶后来被命名为(),这是第一个分离到的Ⅱ类限制性内切核酸酶。
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目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
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限制性核酸内切酶切割DNA时可产生:
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限制性核酸内切酶切割DNA后可产生
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限制性核酸内切酶切割 DNA 时可产生:
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限制性核酸内切酶切割 DNA 后产生
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限制性核酸内切酶切割双链DNA后产生特殊末端,即 末端和 末端。
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利用同一限制性内切酶作用产生的粘性末端的DNA片段,都能通过互补碱基配对连接。()
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用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接,采用下列哪种酶处理,可防止载体自身环化( )
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