DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。

相似题目

• 用限制性内切酶将某种生物的DNA切成不同片段，并把所有片段随机地分别连接到用同样内切酶切过的基因载体上，然后分别转移到适当受体细胞中，如细菌。通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系或克隆。如果所制备的克隆数目已多到可把某种生物的全部基因都包含在内时，这一组克隆就成为该种生物的（）

  A . A．无性繁殖系 B . B．基因文库 C . C．PCR扩增 D . D．基因的物理图谱

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• 外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同，其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同，而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法，称作（）。

  A . 电转化重组DNA技术 B . 共转化重组DNA技术 C . 体外包装转染重组DNA技术 D . 脂质体导入重组DNA技术

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• DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括

  A . A．基因诊断 B . B．基因治疗 C . C．转基因和基因敲除 D . D．单克隆抗体制备 E . E．基因工程药物、疫苗和抗体

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• 重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是（）

  A . A.磷酸钙共沉淀法 B . 脂质体法 C . 显微注射法 D . 噬菌体感染 E . 氯化钙法

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• EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要（）。

  A . 用65℃处理 5～10 分钟使限制性内切核酸酶失活 B . 用CIP处理载体 DNA防止自身环化 C . 进行琼脂糖凝胶电泳监测 D . 上述说法都正确

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• 某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有（）

  A . 4个 B . 3个 C . 2个 D . 至少2个

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• 重组DNA技术的发展与载体的发现和研究密切相关，作为载体应当具备哪些条件？

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• 用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。

  A . 正确 B . 错误

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• 载体是能携带目的基因进入宿主细胞，实现外源DNA的无性繁殖，或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子，是重组DNA技术中一个重要的工具。载体必须具备的特性中不包括（）

  A . A.具备自我复制的能力，有较高的拷贝数 B . 载体必须具有一个或多个筛选标志 C . 能容纳外源性的DNA分子 D . 具备一个或多个限制性内切酶的单一识别和切割点 E . 必须能够表达外源基因

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• 原核DNA复制中①DNA聚合酶Ⅲ；②解旋酶；③DNA聚合酶Ⅰ；④引物酶；⑤DNA连接酶；⑥SSB的作用顺序是（）

  A . A.④③①②⑤⑥ B . B.②③⑥④①⑤ C . C.④②①⑤⑥③ D . D.④②⑥①③⑤ E . E.②⑥④①③⑤

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• DNA复制需要：①DNA聚合酶Ⅲ；②解链蛋白；③DNA聚合酶I；④DNA指导的RNA聚合酶；⑤DNA连接酶参加。其作用的顺序是

  A . A．4，3，1，2，5 B . B．2，3，4，1，5 C . C．4．2，1，5，3 D . D．4，2，1，3，5 E . E．2，4，1，3，5

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• 用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。

  A . 正确 B . 错误

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• 重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）

  A . A.标志补救筛选 B . 插入表达筛选 C . 抗性筛选 D . 限制性内切酶酶切图谱分析 E . 核酸分子杂交筛选

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• 实验室内常用的连接外源性DNA与载体DNA的酶是（）

  A . Taq酶 B . T4DNA连接酶 C . DNA聚合酶Ⅰ D . DNA聚合酶Ⅱ E . DNA聚合酶Ⅲ

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• 用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。

  A . 正确 B . 错误

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• 用连接酶将 Sau 3AI（，bGATC）切割的 DNA与经 BamHI（G↓’GATCC）切割的 DNA连接起来后，能够被 BamHI 切割的机率有多大（用百分比表示）？

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• 载体是能携带目的基因进入宿主细胞，实现外源DNA的无性繁殖，或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子，是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为（）

  A . A.黏粒载体 B . 人工染色体 C . 质粒载体 D . 噬菌体载体 E . 病毒载体

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• DNA重组技术和遗传工程的出现，才导致了微生物学的许多重大发现，包括质粒载体、限制性内切酶、连接酶、反转录酶等。（）

  A . 正确 B . 错误

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• 用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP将它们脱磷酸。

  A . 正确 B . 错误

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• DNA复制需要①DNA聚合酶Ⅲ，②解链酶，③DNA聚合酶Ⅰ，④DNA指导的RNA聚合酶，⑤DNA连接酶。其作用顺序是（）。

  A．②④①③⑤ B．②③④①⑤ C．④②①⑤③ D．④②①③⑤

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• 实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是

  A．Taq酶 B．T4DNA连接酶 C．DNA聚合酶I D．DNA聚合酶Ⅱ E．DNA聚合酶Ⅲ

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• 外源基因必须插入到克隆载体或表达载体中，形成具有自主复制起点的“重组DNA分子”后才能导入宿主细胞。

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• 一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其（)发生改变。

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• DNA重组通常包括如下五个步骤：⑴获得需要的目的基因转化受体细胞，使之进入受体细胞并能够在受体细胞内复制和遗传。 ⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等，最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。 ⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用，形成重组DNA分子，并对其加以克隆和筛选。 ⑸对获得外源基因的受体细胞（转化子）进行筛选和鉴定。 上述五个步骤按通常的操作技术应依（）顺序进行

  A．⑴、⑵⑶、⑷、⑸ B．⑴、⑵⑸、⑷、⑶ C．⑴、⑷⑵、⑸、⑶ D．⑴、⑵⑸、⑶、⑷

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