用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT，BamHI 识别的序列为 GGATCC，用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA，不必使酶失活，就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端，那么接近末端的程度也影响切割，如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
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如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。
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通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的（）。
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用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。
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限制性核酸内切酶，简称限制酶，是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生（）
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限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后，再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失，可得到一系列大小不同的缺失突变体。
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Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在 20~40kDa，通常由（）亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA，或 DNA／RNA 杂合链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有（）专一性，也具有（）的专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有（），产生（）末端的DNA片段或（）的DNA片段。作用时需要（）作辅助因子，但不需要（）和（）。
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用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。
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某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后，产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。
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限制性核酸内切酶，简称限制酶，是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型，其中应用最广的是（）
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用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末端，该酶在 lac 基因内有切割位点，并在第二个氨基酸密码子内，该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后，用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端，然后重新连接成环，转化 Lac-Tets受体菌，筛选 Tet 转化子，问：Lacr的基因型是什么？并说明原因。
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用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定（）的；用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端一定是（）的。
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目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
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限制性核酸内切酶切割DNA时可产生：
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限制性核酸内切酶切割DNA后可产生
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限制性核酸内切酶切割 DNA 时可产生：
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限制性核酸内切酶切割 DNA 后产生
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限制性核酸内切酶切割双链DNA后产生特殊末端，即 末端和 末端。
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利用同一限制性内切酶作用产生的粘性末端的DNA片段，都能通过互补碱基配对连接。（)
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某限制性内切核酸酶按AATTAATT方式切割，产生的末端突出部分含：（）
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用一限制性内切核酸酶切割Lac+Tetr的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末
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限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸。（)
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用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接，采用下列哪种酶处理，可防止载体自身环化( )
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