目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
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限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT,BamHI 识别的序列为 GGATCC,用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA,不必使酶失活,就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端,那么接近末端的程度也影响切割,如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
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取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是()
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如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
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通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的()。
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为什么使用限制性内切核酸酶对基因组DNA进行部分酶切?()
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用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
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能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌,其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。
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用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()
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在基因操作中所使用的限制性核酸内切酶是指()
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基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性,而且有甲基化酶的活性。
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用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连接。
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同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
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在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指()
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对同一种酶、不同个体基因组DNA来说,其酶切点的()、()不同,因此,切出的()和()会有差异。限制性内切酶的选择是根据(),使用(),观察(),检测()而定的。
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用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在 lac 基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化 Lac-Tets受体菌,筛选 Tet 转化子,问:Lacr的基因型是什么?并说明原因。
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基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。
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粘性末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的
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平头末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的。
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限制性核酸内切酶切割双链DNA后产生特殊末端,即 末端和 末端。
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某限制性内切核酸酶按AATTAATT方式切割,产生的末端突出部分含:()
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用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接,采用下列哪种酶处理,可防止载体自身环化( )