用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接,连接产物会含大量自身环化载体,采用下列哪种酶处理,可防止自身环化()
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在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
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限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT,BamHI 识别的序列为 GGATCC,用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA,不必使酶失活,就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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利用工具酶对基因进行人工切割和连接操作的酶有()、()和()。
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为了构建重组质粒pZHZ2,可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1,然后用相应的酶连接下列叙述中错误的是()
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限制酶切割后的产物连接反应效果差,可能原因是()
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是()
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EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要()。
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在基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段中,需使用()
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pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接,无论用哪种方法连接,都可以用同一种酶回收外源片段。
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用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
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重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()
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采用BamHI单切载体和目的基因后,进行重组连接前要()
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目的基因和载体的连接方式有有()、()和()。
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用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连接。
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利用工具酶对基因进行人工切割和连接操作的酶有限制性内切酶、()和()。
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用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在 lac 基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化 Lac-Tets受体菌,筛选 Tet 转化子,问:Lacr的基因型是什么?并说明原因。
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用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后,为防止它们自身环化,要用 CIP将它们脱磷酸。
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为提高重组转化效果,对同一种酶切后载体进行()处理。
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目的基因与载体的连接方式有
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目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
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可以连接的目的基因与载体的末端有:
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用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接,采用下列哪种酶处理,可防止载体自身环化( )
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【单选题】基因工程中,切割目的基因和载体所用的限制酶及切口必备的特点是()。
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常用于目的基因与表达载体连接的方式有()
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