某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时,出现了星号活性,请分析可能的原因?
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蓝白斑筛选标记基因实验中,蓝色斑表示是插入了外源片段重组质粒的菌落。
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在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
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在 Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中,用 EcoRI 切割了 R6-5 质粒,然后转化 E.coliC600,在卡那霉素抗性子板上筛选到了 pSCl02,它是由 R6-5 的三个 EcoRI 片段组成,请推测这个质粒具有什么遗传特性?
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取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
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EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要()。
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在基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段中,需使用()
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Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应,然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物,通过 X射线分析发现了什么?
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某种线性DNA含有限制性核酸内切酶EcoRI的1个酶切位点。该DNA样品(甲)经EcoRI酶切后,在DNA连接酶催化下形成产物乙。则反应液中产物乙共有()
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用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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已知某一内切核酸酶在一环状 DNA上有 3 个切点,因此,用此酶切割该环状 DNA,可得到 3 个片段。
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某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时,出现了星号活性,请分析可能的原因?
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用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA,并进行克隆,在前者的克隆中筛选到 A基因,但在后者的克隆中未筛选到 A基因,请说明原因。
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某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段,并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组,这个过程称为()
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PCR扩增目的片段时,在第几个循环后才出现目的片段长度的双链DNA分子?()
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Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在 20~40kDa,通常由()亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA,或 DNA/RNA 杂合链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有()专一性,也具有()的专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有(),产生()末端的DNA片段或()的DNA片段。作用时需要()作辅助因子,但不需要()和()。
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根据噬菌体的包装能力,将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体,该载体的最小分子大小约为()kb,插入的外源片段最大不超过()kb。
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用 Sal I切割从噬菌体 J2 分离的DNA时,得到 8 个片段,分别是:1.3、2.8、3.6、5.3、7.4、7.6、8.1 和11.4kb。但是,用 SaI I 切割从被感染的寄主细胞中分离到的 J2 噬菌体DNA 时,只得到 7 个片段,分别是:1.3、2.8、7.4、7.6、8.1、8.9 和 11.4kb,根据这些结果,您得到哪些信息?
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同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
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如果用限制酶切割DNA后得到的片段比预期的多,可能原因是()
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某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后,产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段,将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环,然后导入受体细胞,都可以进行独立地复制。
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DNA复制是随从链的复制方向与解链方向(),不能顺着解链方向(),从而出现了一些(),称为()片段。
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某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段,并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组的过程,称为()
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用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后,为防止它们自身环化,要用 CIP将它们脱磷酸。
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在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时,应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应。()