某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

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  A . 正确 B . 错误

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• 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind  Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。   如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？

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  A . 正确 B . 错误

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• EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要（）。

  A . 用65℃处理 5～10 分钟使限制性内切核酸酶失活 B . 用CIP处理载体 DNA防止自身环化 C . 进行琼脂糖凝胶电泳监测 D . 上述说法都正确

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• 在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，需使用（）

  A . 同种限制酶 B . 两种限制酶 C . 同种连接酶 D . 两种连接酶

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• Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

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  A . 1种 B . 2种 C . 3种 D . 4种

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• 用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。

  A . 正确 B . 错误

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• 已知某一内切核酸酶在一环状 DNA上有 3 个切点，因此，用此酶切割该环状 DNA，可得到 3 个片段。

  A . 正确 B . 错误

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• 用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到 A基因，但在后者的克隆中未筛选到 A基因，请说明原因。

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• 某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组，这个过程称为（）

  A . A、接合 B . B、性导 C . C、转导 D . D、转化

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• PCR扩增目的片段时，在第几个循环后才出现目的片段长度的双链DNA分子？（）

  A . 第一个循环 B . 第二个循环 C . 第三个循环 D . 第四个循环

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• Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在 20~40kDa，通常由（）亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA，或 DNA／RNA 杂合链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有（）专一性，也具有（）的专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有（），产生（）末端的DNA片段或（）的DNA片段。作用时需要（）作辅助因子，但不需要（）和（）。

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• 根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为（）kb，插入的外源片段最大不超过（）kb。

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• 用 Sal I切割从噬菌体 J2 分离的DNA时，得到 8 个片段，分别是：1.3、2.8、3.6、5.3、7.4、7.6、8.1 和11.4kb。但是，用 SaI I 切割从被感染的寄主细胞中分离到的 J2 噬菌体DNA 时，只得到 7 个片段，分别是：1.3、2.8、7.4、7.6、8.1、8.9 和 11.4kb，根据这些结果，您得到哪些信息？

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• 同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。

  A . 正确 B . 错误

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• 如果用限制酶切割DNA后得到的片段比预期的多，可能原因是（）

  A . 限制酶失活 B . 限制酶的星号活性 C . 有其他限制酶污染 D . 有抑制剂存在 E . 测试DNA中有其他DNA污染

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• 某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后，产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。

  A . 正确 B . 错误

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• DNA复制是随从链的复制方向与解链方向（），不能顺着解链方向（），从而出现了一些（），称为（）片段。

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• 某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组参入到自己染色体组的过程，称为（）

  A . A、接合 B . B、性导 C . C、转导 D . D、转化

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• 某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

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• 用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP将它们脱磷酸。

  A . 正确 B . 错误

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• 在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时，应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应。（)

  是 否

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